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| 第4卷第2期 |
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骨髓间充质干细胞的贴壁培养及内毒素对其增殖活性的影响 |
| 郝彦琴 卢宁 李红
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【摘要】 目的 贴壁法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),并观察不同浓度内毒素对其增殖活性的影响。方法 采用全骨髓贴壁培养法培养大鼠BMSCs,倒置显微镜下观察细胞形态,免疫细胞化学方法检测细胞CD44、CD29、CD34的表达,流式细胞术检测细胞周期。加不同浓度的内毒素(0、0.01 μg/ml、0.1 μg/ml、1 μg/ml、10 μg/ml、100 μg/ml和LPS组)作用24 h,用四唑盐比色法(MTT)检测BMSCs的增殖。结果 分离培养的细胞3代以后呈均一的成纤维细胞样形态,高表达CD44,但不表达CD34、CD45。80%以上的第三代BMSCs 处于G1期。不同浓度的LPS作用24 h后各组的平均吸光度值(A值)差异有统计学意义(F = 3.598,P = 0.007);0.01 μg/ml LPS组A值与其余各组相比,具有统计学意义(P < 0.05)。结论 全骨髓贴壁培养法可以方便、快捷地获得BMSCs,其在形态学、细胞表面标志物表达和多向分化能力方面具有干细胞生物学特性;0.01 μg/ml LPS可明显促进BMSCs的增殖。 |
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